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何谓过柱子

 更新时间:2024-05-22 点击量:166

我们常说过柱子其实就是柱层析分离,也叫柱色谱,1903年由俄罗斯科学家第一次发明使用,其把植物色素的溶液经过粉碎的碳酸钙粉末,发现从上到下在碳酸钙粉末上有不同的色带,通过对不同色带的分开提取,得到了较纯叶绿素,叶黄素等。

该方法经过经过百年的发展至今已经比较成熟,固定相也从单一的碳酸钙粉末发展到了氧化铝(又分为酸性、中性、碱性),硅胶,活性炭等,其中各大实验室常用的便是硅胶,一般分为正相硅胶和反相硅胶!

固定相(硅胶)一般要经过纯化和活性处理,颗粒大小应当均匀统一,理论上其颗粒越小、同单位质量表面积越大,吸附能力就越高,分离效果也就越好。但是实际使用中固定相的颗粒太小时往往会存在两个情况,一个是其质更轻,容易飘散在空气中(硅胶进入人体无法降解,越细越毒);二是颗粒小也会导致颗粒之间缝隙小,从而使溶剂的流速就太慢,耗时;以硅胶为例,目前已经商业化用量最大的硅胶尺寸为200-300目。

过柱手段这块,除了前面说的正向循环制备,高效液相制备,过柱机这些自动分析的设备,手动过柱方面主要分为常压过柱,减压过柱,加压过柱三种。

其中减压过柱,因为洗脱剂流速过快,会损失大半部分塔板数,分离效果较差,适合分离TLC板子分的比较开的样品,尤其适合产物只有一个大极性杂质的样品;所有其大多数时间被用于化合物的预处理,过掉部分杂质后再仔细纯化。要注意的是,使用过程中因为负压带来的溶剂挥发,会导致柱子外表面大量水珠凝结,对水敏感的化合物不要轻易尝试。

常压过柱是三者中分离效果更好的一种过柱方式,但是因为很多时候溶剂走的太慢,分离效果再好也会影响效率,所以这时候一般会给与压力,这就是所谓加压过柱;但这个压力不宜过高,一般手动的用双链球,自动的就用个养鱼泵,两者都可以改装一下。

(内容来源:有机大菜仔)


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